直接膽*素（DBIL）含量檢測(cè)試劑盒說明書

                                            微量法

貨號(hào)：BC5175

規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

產(chǎn)品說明：

直接膽*素（Direct bilirubin，DBil）又稱結(jié)合膽*，是由間接膽紅*進(jìn)入肝后受肝內(nèi)葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶的作用與葡萄糖醛酸結(jié)合生成的。直接膽*素增高對(duì)臨床診斷阻塞性黃疸、肝細(xì)胞性黃疸、肝癌、胰頭癌、膽石癥、膽管癌等有重要意義。直接膽*素能被亞*鈉氧化，生成膽綠素。通過檢測(cè)450nm下波長變化，可計(jì)算出直接膽*素的含量。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

血清、血漿等液體樣本：直接測(cè)定。若溶液渾濁，可以離心后取上清進(jìn)行測(cè)定。

二、測(cè)定步驟

1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm，分光光度計(jì)用蒸餾水調(diào)零。

2、 按下表步驟加樣：（96孔板或者EP管中加入下列試劑）

三、DBIL含量計(jì)算

1、 計(jì)算公式

（1）使用96孔板：

DBIL含量（μmol/L）=1495.7×（ΔA測(cè)定-ΔA空白）-15.343

（2）使用微量比色皿：

DBIL含量（μmol/L）=1099.7×（ΔA測(cè)定-ΔA空白）-10.73

注意事項(xiàng)：

1、膽*素見光易分解，測(cè)定時(shí)要盡量避光。

2、如果ΔA＜0或過低，建議增加樣本量后再進(jìn)行測(cè)定；如果ΔA＞0.5，建議稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1、 取非正常小鼠血清按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A1測(cè)定-A2測(cè)定=0.217-0.170=0.047，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.044-0.044=0，計(jì)算含量得：

DBIL（μmol/L）= 1495.7×（ΔA測(cè)定-ΔA空白）-15.343=54.95 μmol/L。

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