儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
NADP-蘋果酸脫氫酶活性檢測試劑盒輔酶
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
NADP-Malate Dehydrogenase(NAD-MDH) Activity Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號(hào)：BC1050-50T/48S

更新時(shí)間：2024-04-24

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1722

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號(hào)系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-MDH）活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號(hào)：BC1050
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體50 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體40 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×2支	-20℃保存
試劑三	粉劑×2支	-20℃保存

溶液的配制：

試劑二：臨用前加入250 μL雙蒸水，用不完的試劑仍-20℃保存；
試劑三：臨用前加入300 μL雙蒸水，用不完的試劑仍-20℃保存。

產(chǎn)品說明：
MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物，連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性，MDH分為NAD^-依賴的MDH和NADP^-依賴的MDH，NADP-MDH主要存在于真核細(xì)胞中。
NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸，導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng)：

樣本的提取必須在0℃-4℃中操做完成，以防止酶變性失活。
實(shí)驗(yàn)時(shí)，試劑二、試劑三和樣本在冰上放置，以免變性和失活。試劑一37℃放置。
建議一人加樣一人比色。盡量保持反應(yīng)溫度為37℃。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.1g大鼠心臟組織加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，測得計(jì)算ΔA測定管=A1測定-A2測定=0.694-0.628=0.066，ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.652-0.643=0.009，ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.057，按樣本鮮重計(jì)算酶活得：

NADP-MDH（U/g 鮮重）=6430×ΔA÷W=6430×0.057÷0.1=3665.1 U/g 鮮重。
參考文獻(xiàn)：

Yao Y X, Li M, Zhai H, et al. Isolation and characterization of an apple cytosolic malate dehydrogenase gene reveal its function in malate synthesis[J]. Journal of plant physiology, 2011, 168(5): 474-480.

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