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蛋白質(zhì)電泳Tris-Tricine-SDS-PAGE凝膠緩沖
產(chǎn)品簡介:

蛋白質(zhì)電泳Tris-Tricine-SDS-PAGE凝膠緩沖
貨號:T1230
規(guī)格:25T/50T/100T
本產(chǎn)品所提供的 APS(過硫酸銨)為固體粉末,使用前加入雙蒸水溶解即配制成 10%APS 溶液(0.5g APS加 5ml 雙蒸水) ,將溶液分裝后置于-20℃保存,通常半年內(nèi)有效。溶液在使用中可放置 4℃保存兩周。

產(chǎn)品型號:T1230

更新時間:2025-08-25

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :2497

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產(chǎn)品介紹

蛋白質(zhì)電泳Tris-Tricine-SDS-PAGE凝膠緩沖
貨號 :T1230
規(guī)格 :25 塊/50 塊/100 塊 PAGE 凝膠


產(chǎn)品內(nèi)容

 25T50T100T保存條件
49.5%T 3%C 15ml 30ml60ml 2-8℃,避光
49.5%T 6%C 50ml100ml200ml2-8℃,避光
凝膠緩沖液 70ml140ml280ml2-8℃,避光
50%甘油30ml 60ml120ml 室溫
APS0.25g0.5g1.0g 室溫
TEMED 400ul 750ul1.5ml室溫,避光
說明書一份 一份 一份  

     本產(chǎn)品所提供的 APS(過硫酸銨)為固體粉末,使用前加入雙蒸水溶解即配制成 10%APS 溶液(0.5g APS加 5ml 雙蒸水) ,將溶液分裝后置于-20℃保存,通常半年內(nèi)有效。溶液在使用中可放置 4℃保存兩周。


產(chǎn)品簡介 :
    常規(guī)的 Tris-SDS-PAGE 電泳的只能分辨大分子蛋白, 對于相對分子量小的, 尤其是 10 kD 以下的蛋白分辨率極低。而 Tricine-SDS-PAGE 可以很好的分離分子量在 1-10 kD 的蛋白及多肽,成為目前電泳法變性分離多肽的主要方法。本產(chǎn)品包括 Tricine-SDS- PAGE 凝膠制備所需全套試劑,只需自備蒸餾水,即可制備高質(zhì)量各種濃度的凝膠,方便、快捷,電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。 

    聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑N,N-甲叉雙丙烯酰胺在加速劑N,N,N,N—四甲基乙二胺(簡稱TEMED)和催化劑過硫酸銨(簡稱AP)或核黃素(即vitamin B2)的作用下聚合交聯(lián)成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠,以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳
(polyacrylamide gel electrophoresis,簡稱PAGE)


    SDS-PAGE是在要電泳的樣品中加入含有SDS和β-巰基乙醇(或者DTT)的樣品處理液,SDS可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級和三級結(jié)構(gòu),β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)。SDS還與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時各種蛋白質(zhì)分子本身的電荷*被SDS掩蓋。這樣電泳時,就消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷及結(jié)構(gòu)上的差異,電泳速度只是與蛋白質(zhì)分子量有關(guān)。用本法測定蛋白質(zhì)的分子量只需根據(jù)待測蛋白質(zhì)在已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)圖中的位置,就能得知分子量。


注意事項 :
    1、 10%APS 配制后分裝-20 度保存。 APS 溶液不穩(wěn)定, 應(yīng)盡量減少室溫存放時間, 每次取用后立即放回冰箱,以防失效;若發(fā)現(xiàn)凝膠聚合時間延長,應(yīng)考慮更換,使用-20 度保存的 10%APS。
    2、在凝膠配制過程中,尤其是液體混勻步驟,應(yīng)盡量避免氣泡的產(chǎn)生。
    3、在分離膠上層加蒸餾水時要小心操作,加水時速度不能太快。
    4、丙烯酰胺具有神經(jīng)毒性,操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。
    5、本產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體實驗或人體治療。


配膠說明 :
    根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適的 PAGE 分離膠配制濃度,凝膠濃度配方參考附表。

分離膠 夾層膠濃縮膠
 20%/4.5ml16.5%/4.5ml15.5%/4.5ml10%/2ml 4%/2ml
49.5%T 3%C0.407ml0.160ml
49.5%T 6%C 1.82ml 1.50ml 1.395ml  //
凝膠緩沖液 1.50ml 1.50ml1.50ml 0.667ml0.496ml
50%甘油 0.96ml0.96ml 0.96ml//
ddH 2 O0.22ml0.54ml0.645ml0.926ml1.344ml
10%APS 40µl40µl40µl20µ|20µ|
TEMED 5µl5µl5µl3µl3µl

 

I 配制分離膠
    1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 6%C 、凝膠緩沖液和甘油加入到離心管中混合。
    2、加入 10%APS 和 TEMED,立即渦旋混勻 5-10 秒,以使溶液充分混勻。
    3、在凝膠模具中迅速灌入適量分離膠溶液(1 mm mini-gel,分離膠溶液加約 4 ml ) ,然后在分離膠溶液上輕輕 覆蓋一層 1-3 cm 的水層,使凝膠表面保持平整。
    4、靜置,待分離膠和水層之間出現(xiàn)一個清晰的界面表示凝膠已聚合。
II  配制夾層膠
    去除覆蓋在分離膠上的水層,用濾紙將殘留的水盡量吸去。
    1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 3%C 和凝膠緩沖液加入到離心管中混合。
    2、加入 10%過硫酸銨和 TEMED,立即渦旋混勻 5-10 秒,以使溶液充分混勻。
    3、將適量的夾層膠溶液迅速加分離膠的上面(對于 1 mm 的 mini-gel,夾層膠溶液加約 1 ml ) , 然后在夾層膠溶液上輕輕覆蓋一層水層,使凝膠表面保持平整。
    4、靜置,待夾層膠和水層之間出現(xiàn)一個清晰的界面表示凝膠已聚合。
III 配制濃縮膠去除覆蓋在夾層膠上的水層,用濾紙將殘留的水吸去。
    1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 3%C 和凝膠緩沖液加入到離心管中混合。
    2、加入 10%過硫酸銨和 TEMED,立即渦旋混勻 5-10 秒,以使溶液充分混勻。
    3、將梳子插入凝膠內(nèi),避免產(chǎn)生氣泡。
    4、待凝膠聚合后,小心地拔出梳子,以免破壞加樣孔。
    5、進行電泳操作。


IV 電泳
   將電泳槽放入 4℃或冰水浴中,外槽加入陽極緩沖液(T1225) ,內(nèi)槽加入陰極緩沖液(T1215) ,30V 預(yù)電泳
   10min,將樣品(已經(jīng)過 Tricine 上樣緩沖液 P1325 處理)加入點樣孔后 30V 電泳 1 小時,100V 電泳溴酚
   藍(lán)到達(dá)膠底部后停止電泳,進行后續(xù)的考馬斯亮藍(lán)染色或電轉(zhuǎn)。


相關(guān)產(chǎn)品 :

PC0020 BCA 蛋白濃度測定試劑盒
P1200 SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒
P1325  2 × Tris-Tricine-SDS-PAGE  上樣緩沖液 ( 含 DTT)
T1215  1 × Tris-tricine-SDS-PAGE 電泳緩沖液(陰極 - )
T1225  1 × Tris-tricine-SDS-PAGE 電泳緩沖液(陽極 + )
PR1300 超低分子量蛋白 MARKER

 

蛋白質(zhì)電泳Tris-Tricine-SDS-PAGE凝膠緩沖訂購說明:

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


運輸說明:

1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。

 

常規(guī)的Tris-SDS-PAGE電泳的只能分辨大分子蛋白,對于相對分子量小的,尤其是10kD以下的蛋白分辨率極低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分離分子量在1-10 kD的蛋白及多肽,成為目前電泳法變性分離多肽的主要方法。Tris-Tricine-SDS-PAGE凝膠制備試劑盒包括Tricine-SDS-PAGE凝膠制備所需全套試劑,只需自備蒸餾水,即可制備高質(zhì)量各種濃度的凝膠,方便、快捷,電泳后可直接用于考染、銀染、Western雜交等實驗。

參考文獻(xiàn):
《Quantitative Evaluations of a Novel Detergent-Based Method for Decellularization of Human Cervical Carcinoma Tissues》 作者:Pengpeng Xiao, Jicheng Han, Ying Zhang, Chenghui Li, Xiaofang Guo, Shubo Wen, Mingyao Tian, Yiquan Li, Maopeng Wang, Hao Liu, Jingqiang Ren, Hongning Zhou,Huijun Lu and Ningyi Jin, 期刊:Cellular and Infection Microbiology 影響因子: PMID:
《Extraction of Extracellular Matrix in Static and Dynamic Candida Biofilms Using Cation Exchange Resin and Untargeted Analysis of Matrix Metabolites by Ultra-High-Performance Liquid Chromatography-Tandem Quadrupole Time-of-Flight Mass Spectrometry (UPLC-Q-TOF-MS)》 作者:Wenyue Da, Jing Shao, Qianqian Li, Gaoxiang Shi, Tianming Wang, Daqiang Wu and Changzhong Wang 期刊:Frontiers in Microbiology 影響因子:4.259 PMID:31110494

 

索萊寶公司堅持與接軌,注重和企業(yè)的合作與交流,并提供產(chǎn)品代理、市場咨詢等多項服務(wù)。公司將一如既往與世界更多合作,不斷為廣大生物科研工作者提供更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)。公司理念:“為科研服務(wù),為生命盡責(zé)”。一個人能夠走多遠(yuǎn),取決于與誰同行。索萊寶公司期待與各同行精誠合作。

索萊寶誠招生物試劑研發(fā)人員,期待與廣大同行精誠合作,為廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,高效的物流以及專業(yè)的售后服務(wù)。索萊寶感謝所有朋友的支持與幫助,您的支持是我們前進的動力和保障。讓我們攜手同行,共同創(chuàng)造美好的明天。

 

 

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