蛋白Marker(若為熒光蛋白上樣緩沖液配套的預(yù)染蛋白Marker)的作用如下:
1.分子量參照標(biāo)準(zhǔn)
在聚丙烯酰胺凝膠電泳中,
蛋白Marker作為已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)“尺子”,通過(guò)條帶位置對(duì)比,可精確推算目標(biāo)蛋白的分子量。這對(duì)于鑒定新蛋白或確認(rèn)蛋白完整性至關(guān)重要,例如研究抗癌藥物靶點(diǎn)蛋白時(shí),分子量測(cè)定是初步特征描述的關(guān)鍵步驟。
2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程可視化監(jiān)控
若P1050為預(yù)染型蛋白Marker,其條帶在電泳過(guò)程中可直接觀察,幫助實(shí)時(shí)判斷電泳狀態(tài):
電泳進(jìn)度控制:通過(guò)預(yù)染條帶位置,預(yù)測(cè)目標(biāo)蛋白進(jìn)入凝膠最佳分辨區(qū)(如膠的2/3處)時(shí)停止電泳,優(yōu)化分辨率。
異常情況預(yù)警:若Marker條帶出現(xiàn)模糊、缺失或遷移異常,可及時(shí)終止實(shí)驗(yàn)并排查問(wèn)題(如凝膠濃度、電壓設(shè)置等)。
3.轉(zhuǎn)膜效率驗(yàn)證
在WesternBlot實(shí)驗(yàn)中,預(yù)染蛋白Marker可隨轉(zhuǎn)膜過(guò)程遷移至膜上,直觀顯示轉(zhuǎn)膜是否成功:
轉(zhuǎn)膜完整性評(píng)估:通過(guò)膜上Marker條帶的清晰度,確認(rèn)蛋白是否全轉(zhuǎn)移。
分子量標(biāo)記功能:在膜上直接標(biāo)注蛋白分子量,無(wú)需額外操作,簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程。
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性保障
條帶清晰銳利:預(yù)染Marker的條帶設(shè)計(jì)(如單色加深某些條帶、多色區(qū)分)便于快速識(shí)別分子量范圍,減少人為誤差。
穩(wěn)定性與重復(fù)性:高質(zhì)量預(yù)染Marker在不同緩沖體系和凝膠系統(tǒng)中表現(xiàn)穩(wěn)定,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可重復(fù),適合多批次或跨實(shí)驗(yàn)室對(duì)比研究。
5.特殊實(shí)驗(yàn)需求適配
熒光成像兼容性:若P1050為熒光蛋白上樣緩沖液配套的預(yù)染Marker,其熒光特性可與紫外燈、LED燈等成像系統(tǒng)兼容,無(wú)需染色脫色步驟,直接觀察凝膠或膜上的蛋白條帶,提高實(shí)驗(yàn)效率。
極*條件耐受性:部分預(yù)染Marker支持80℃高溫處理或-20℃長(zhǎng)期保存,適應(yīng)復(fù)雜實(shí)驗(yàn)環(huán)境。