組織學(xué)被定義為對細(xì)胞和組織的微觀結(jié)構(gòu)（顯微解剖學(xué)）的科學(xué)研究，其重要組成就是組織的制片和染色觀察。隨著顯微鏡技術(shù)和免疫實驗等的發(fā)展，組織制片切片技術(shù)也得到了廣泛的應(yīng)用，自常用的石蠟切片、冰凍切片中演化出了碳蠟切片、塑封切片、振動切片和超薄切片等等適用于不同實驗需求的制片方式。今天，小編就來帶大家一起了解一下這些切片方式和它們的應(yīng)用方向。

1、石蠟切片

常規(guī)染色，組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片。

原因：石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好，并且對抗原基本無影響

如HE染色、結(jié)締組織多色染色、神經(jīng)組織染色、細(xì)胞內(nèi)色素以及沉著物染色、DAB顯色、熒光標(biāo)記染色等均建議優(yōu)先制成石蠟切片。

例：

腦組織-尼氏染色-冰凍切片	腦組織-尼氏染色-石蠟切片

肝組織-Masson染色-冰凍切片	肝組織-Masson染色-石蠟切片

2、碳蠟切片

   不經(jīng)過脫水透明步驟，對于脂質(zhì)等結(jié)構(gòu)保存效果優(yōu)于石蠟切片，適用于肝臟組織用甲醛鈣固定液固定后的油紅O染色，

3、塑封切片

對于硬度較高的成骨組織鈣鹽染色和較韌的植物組織染色，例如鈣鹽茜素紅染色和植物甲苯胺藍(lán)染色，可以考慮制成塑封切片，降低切片難度，從而更好的顯示鈣鹽沉積情況和植物的顯微結(jié)構(gòu)。

4、超薄切片

   對于高爾基染色電鏡觀察之前，用于陽性神經(jīng)元部位定位。

5、冰凍切片

脂質(zhì)染色(油紅O染色，蘇丹染色)必須做冰凍切片，使用異丙醇固定（不能使用丙酮固定，會脫脂），經(jīng)多聚甲醛固定后脂質(zhì)會呈空泡狀態(tài)。腦組織NOS酶染色可以先使用PFA-蔗糖溶液固定沉糖脫水后再進(jìn)行包埋切片。

脂肪肝組織-油紅O染色-石蠟切片	脂肪肝組織-油紅O染色-冰凍切片

6、速凍切片

對于不能固定的新鮮組織酶化學(xué)染色，宜采取直接使用液氮速凍、OCT包埋制成切片，大部分酶活均能很好保存下來，如ATP酶染色、ALP染色、ROS染色、β-半乳糖甘酶染色、SDH染色、MAO染色等。

肺組織-堿性磷酸酶（ACP）染色-石蠟切片	肺組織-堿性磷酸酶（ACP）染色-冰凍切片

7、振動切片

組織不冰凍，無冰晶形成和組織抗原破壞，在免疫組化染色前避免了組織脫水、透明、包埋等步驟對抗原的損害，能較好地保留組織內(nèi)脂溶性物質(zhì)和細(xì)胞膜抗原，主要用于顯示神經(jīng)系統(tǒng)抗原分布研究，如腦組織的高爾基染色。

注意事項

1、需要進(jìn)行石蠟包埋的組織一般不能冰凍。如果標(biāo)本已經(jīng)放在-80℃冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片，將標(biāo)本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定(在固定液內(nèi)邊解凍邊固定)。

2、組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好程度順序：新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>組織-80℃冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片>組織-80℃冷凍后直接冰凍切片。