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當前位置:首頁技術文章產品星推薦|關于間充質干細胞三系誘導染色分析

產品星推薦|關于間充質干細胞三系誘導染色分析

更新時間:2025-04-16點擊次數:750

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關于間充質

干細胞三系誘導染色分析

 

一、MSC三系誘導基本介紹

干細胞,又稱“萬能細胞",是一種未充分分化、尚不成熟的細胞,在適當條件下,具有再生各種組織、器官的潛能,因此被寄予厚望,干細胞研究也多次進入國自然研究熱點排行榜。間充質干細胞(MSC)具有多向分化的潛能,體外在一定條件下可以誘導分化為脂肪細胞、成骨細胞、成軟骨細胞,2006年國際細胞治療協會(ISCT)確定此三項檢測指標是MSC鑒定的必檢項目,MSC的三系誘導在生物醫(yī)藥領域一直深受各位科研人員的青睞和應用。

二、MSC三系分化檢測手段

“成脂分化"

間充質干細胞成脂分化有兩個階段,先是MSC分化為脂肪前體細胞,接著在特定的細胞刺激影響下(如C/EBPs和PPAR-γ)最終分化為脂肪細胞,出現脂肪細胞中顯著的標志物(脂肪滴)。對于脂滴染色,經常采用油紅O染色方法對脂滴進行染色,其原理為油紅O可進入脂滴與其特異性結合將其染成紅色。我司有多款油紅O染色試劑盒,分別適配于組織和細胞樣本,用于細胞染色常推薦G1262,染色后結果可通過圖像處理軟件進行分析,如果想用于后續(xù)定量分析,可以染色后用無水異丙醇或乙醇浸泡細胞3-5min進行顏色提取,用離心管收集溶出的溶液,分取1ml稀釋一定倍數進行紫外分光光度法測量520nm處的OD值。除此之外我們還擁有熒光法試劑盒(內含核染料)用于脂滴染色,結果對比清晰,染色靈敏。

染色示例

相關產品

貨號

名稱

規(guī)格

G1260

飽和油紅O染色液

100ml/

500ml

G1261

改良油紅O染色試劑盒

2*50ml/

2*100ml

G1262

油紅O染色試劑盒

(細胞專用)HOT

4*20ml/

4*50ml

G1263

改良油紅O染色試劑盒

(環(huán)保型)

4*50ml

G1264

脂質熒光染色試劑盒

(尼羅紅法)HOT

2*50ml

G1265

糊精水溶液(1%)

100ml

 

“成骨分化"

MSC成骨分化分為兩個時期,誘導初期會有堿性磷酸酶(ALP)的高度表達,作為成骨細胞分化成熟的早期標志,可通過固藍染色來鑒別。誘導后期,成熟的成骨細胞表達ECM鈣化相關蛋白,長時間的成骨誘導使鈣離子以鈣鹽方式沉淀下來,形成“骨結節(jié)"。骨結節(jié)可通過茜素紅S染色(茜素紅和鈣發(fā)生顯色反應),把外面沉積的鈣結節(jié)染成深紅色,通過著色物面積和深淺來表示成骨分化的強弱。

對于茜素紅染色,我們2024年上新了可以提取鈣鹽染色的輔助試劑-CPC(G1453),以及染色劑+提取劑的試劑盒套裝(G3283),在完成茜素紅染色后,加入提取試劑室溫孵育15-30min使茜素紅染色充分溶解,用離心管收集溶出的溶液,分取100ul或200ul置于96孔板條內用酶標儀測量560nm處的OD值,從而半定量鈣鹽含量。

染色示例

相關產品

貨號

名稱

規(guī)格

分類

G1480

堿性磷酸酶

染色試劑盒

(偶氮偶聯法)HOT

4*2ml/

4*10ml/

4*20ml

ALP

染色

G1481

堿性磷酸酶

染色試劑盒

(改良Gomori鈣鈷法)

3*50ml

G1450

茜素紅S染色液

(0.2%,pH8.3)

100ml/

500ml

茜素紅染色

G1452

茜素紅S染色液

(1%,pH4.2)HOT

100ml

G1453

茜素紅S染色

提取試劑

(CPC,10%)HOT

100ml

G3280

鈣鹽染色試劑盒

(改良茜素紅S 法)

3*50ml

G3281

鈣鹽染色試劑盒

(茜素紅S法)

2*50ml

G3282

鈣鹽染色試劑盒

(Von Kossa法)

2*50ml

G3283

茜素紅S染色

定量檢測試劑盒

(CPC法)HOT

2*20ml/

2*100ml

 

“成軟骨分化"

MSC成軟骨分化可分為兩個時期,首先MSC聚集成團,成團的中間細胞經分裂分化轉變成一種大而圓的細胞,即成軟骨細胞。然后成軟骨細胞繼續(xù)分化產生基質和纖維,不斷交織形成軟骨球狀,可通過阿利新藍來進行鑒別染色,阿利新藍與軟骨基質中的多糖結合,使軟骨細胞和基質呈淺藍色或藍綠色。若想對軟骨含量定量分析,可以使用G1567-阿利新藍染色提取試劑在阿利新藍染色后進行溶解提取顏色,室溫孵育1-2h即可,用離心管收集溶出的溶液,分取100μL或200μL置于96孔板條內用酶標儀測量620nm處的OD值,從而達到半定量軟骨含量目的。

染色示例

相關產品

貨號

名稱

規(guī)格

G1560

阿利新藍染色試劑盒

(pH=2.5)HOT

3*50ml/

3*100ml

G1562

阿利新藍染色液(pH2.5)

100ml

G1563

阿利新藍染色試劑盒

(pH=1.0)

3*50ml

G1565

阿利新藍染色試劑盒

(細胞專用)

2*20ml/

2*50ml

G1567

阿利新藍染色提取試劑HOT

100ml

G2541

軟骨染色試劑盒

(阿利新藍法,pH1.0)

2*50ml

G2542

軟骨染色試劑盒

(阿利新藍法,pH2.5)HOT

2*50ml

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