WB實(shí)驗(yàn)，蛋白質(zhì)印跡又稱免疫印跡，是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。

　　

　　實(shí)驗(yàn)原理：一個(gè)基因表達(dá)結(jié)果是產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)(或酶)。因此，檢測蛋白質(zhì)是測定基因表達(dá)的主要標(biāo)志，檢測蛋白質(zhì)的方法很多，除ELISA法外，也可用與檢測DNA和RNA相類似的吸印方法。

　　

　　而樣本制備是WB實(shí)驗(yàn)的開始也是重要的一步，它的操作雖然并不復(fù)雜，卻有很多需要注意的細(xì)節(jié)。

　　

　　根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要的目標(biāo)蛋白的不同，大致可以分為三種：總蛋白、膜蛋白和核蛋白。總蛋白提取顧名思義就是把組織或細(xì)胞內(nèi)所有的蛋白全都提取出來；膜蛋白、核蛋白提取簡單來說就是把細(xì)胞膜、細(xì)胞核上的蛋白質(zhì)提取出來。

　　

　　不同部位的蛋白要能夠進(jìn)行提取分離，需要用到不同的提取試劑，看起來十分麻煩。其中在應(yīng)用裂解液進(jìn)行裂解的時(shí)候，除了釋放出目標(biāo)蛋白，也同時(shí)釋放出一些酶，這些酶可能會降解我們的目標(biāo)蛋白，所以需要對這部分酶進(jìn)行降解。

　　

　　WB實(shí)驗(yàn)中添加合適的蛋白酶抑制劑（abs9161）或磷酸酶抑制劑（abs9162），全程低溫操作，提前預(yù)冷PBS（abs961）、裂解液甚至槍頭等，從收集細(xì)胞開始一直到煮樣的全過程都應(yīng)該盡可能的保持在冰上操作。